饮料中咖啡因的测定 GB5009.139-2014标准

GB5009.139-2014是食品安全国家标准中关于饮料中咖啡因测定的标准，以下是对该标准的详细解读：

一、标准概述

• 标准号：GB 5009.139-2014

• 发布日期：2014年12月1日

• 实施日期：2015年5月1日

• 发布单位：国家卫生健康委员会（原国家卫生和计划生育委员会）

二、适用范围

该标准规定了可乐型饮料、咖啡、茶叶及其固体和液体饮料制品中咖啡因含量的测定方法，即高效液相色谱法。该方法适用于上述饮料制品中咖啡因含量的测定。

三、测定原理

• 可乐型饮料：脱气后用水提取，再用氧化镁净化。

• 不含乳的咖啡及茶叶液体饮料制品：用水提取，再用氧化镁净化。

• 含乳的咖啡及茶叶液体饮料制品：用三氯乙酸溶液沉降蛋白后，再进行提取和净化。

• 咖啡、茶叶及其固体制品：用水提取，再用氧化镁净化。

经过上述处理后的样品，通过C18色谱柱分离，用紫外检测器检测，Zui后以外标法定量测定咖啡因的含量。

四、试剂和材料

除非另有说明，该方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。主要试剂包括：

• 氧化镁（MgO）

• 三氯乙酸（CCl3COOH）

• 甲醇（CH3OH），色谱纯

• 咖啡因标准品（C8H10N4O2），纯度≥99%

五、仪器和设备

进行咖啡因测定所需的仪器和设备包括：

• 高效液相色谱仪，带紫外检测器或二极管阵列检测器

• 天平，感量为0.1 mg

• 水浴锅

• 超声波清洗器

• 0.45 μm微孔水相滤膜

六、分析步骤

1. 试样制备：根据不同类型的饮料制品，采取相应的前处理方法，如脱气、提取、净化等，制备得到试样溶液。

2. 仪器参考条件：设置高效液相色谱仪的色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温、进样量等参数。

3. 标准曲线的制作：将咖啡因标准系列工作液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以标准工作液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

4. 试样溶液的测定：将试样溶液注入液相色谱仪中，以保留时间定性，记录峰面积，根据标准曲线得到待测液中咖啡因的浓度。平行测定次数不少于两次。

七、分析结果的表述

试样中咖啡因的含量按公式计算得出，结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留三位有效数字。

八、精密度

对于不同类型的饮料制品，该方法的精密度要求有所不同。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的juedui差值不得超过算术平均值的5%（可乐型饮料）或10%（咖啡、茶叶及其固体液体饮料制品）。

九、其他

该方法的线性范围为220 ng/mL~439μg/mL，检出限根据不同类型的饮料制品有所不同。

GB5009.139-2014标准提供了饮料中咖啡因含量的高效液相色谱法测定方法，该方法具有准确度高、精密度好等优点，适用于各种类型饮料制品中咖啡因含量的测定。